<button id="eiwm4"></button>

<rt id="eiwm4"></rt>

嗯灬啊灬把腿张开灬A片小说-久久精品夜色噜噜亚洲A∨-欧美午夜精品久久久久久浪潮-来一水AV@lysav

您好！歡迎訪問上海根生生物科技有限公司網(wǎng)站！

全國服務(wù)咨詢熱線:

15216781845

熱門關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)耗材，實(shí)驗(yàn)試劑，小型儀器及設(shè)備

當(dāng)前位置：首頁 > 技術(shù)文章 > 釀酒酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備、轉(zhuǎn)化

釀酒酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備、轉(zhuǎn)化

更新時(shí)間：2013-08-07 點(diǎn)擊次數(shù)：7316

釀酒酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備

（1）從YPD平板上挑取一個(gè)新鮮的釀酒酵母EBY100單克隆至10 ml YPD液體培養(yǎng)基，30℃，250 rpm 培養(yǎng)過夜。

（2）測(cè)定過夜培養(yǎng)物的OD₆₀₀值為3.0~5.0之間。

（3）將10 ml YPD過夜培養(yǎng)物稀釋至OD₆₀₀值為0.2~0.4。

（4）在28~30℃搖床中繼續(xù)培養(yǎng)3~6 hr，使其OD₆₀₀值達(dá)到0.6~1.0。

（5）于室溫1500 g 離心5 min 收集酵母細(xì)胞，棄上清。

（6）用10 ml 洗液洗酵母細(xì)胞，隨后于室溫1500 g 離心5 min離心收集細(xì)胞，棄上清。

（7）用1 ml TE/LiAc重懸酵母細(xì)胞，以每管50 μl 分裝。

釀酒酵母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化

（1）取50 μl 感受態(tài)細(xì)胞，再加入待轉(zhuǎn)質(zhì)粒各2 μl，混勻。

（2）加入500 μl 轉(zhuǎn)化用溶液（PEG/LiAc，二甲亞砜），彈擊管壁混勻。

（3）30℃水浴1 h，隔15min彈擊管壁混勻。

（4）加入1毫升YPD培養(yǎng)液，30℃搖床培養(yǎng)1小時(shí)。

（5）3500 g 離心5 min ，留沉淀，棄上清。

（6）沉淀用150 μl TE重懸，涂相應(yīng)的SD平板；將平板倒置于30℃培養(yǎng)。

上海根生生物科技有限公司

地址：上海市奉賢區(qū)南橋鎮(zhèn)南橋路377號(hào)1幢

郵箱：genshengtech@163.com

傳真：86-021-64190979

快速鏈接

關(guān)注我們

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息：

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)
了解更多信息